Interaktionen zwischen Streptococcus pneumoniae und purinergen Signaltransduktionswegen in Alveolarepithelzellen
In diesem Projekt werden die Auswirkungen von S. pneumoniae auf den Purinrezeptor P2Y2 und dessen Signalkaskade in pulmonalen Alveolarepithelzellen untersucht. Wir konnten bereits zeigen, dass S. pneumoniae in diesen Zellen eine Inhibition der purinergen Signaltransduktion bedingt. Der Mechanismus dieser Inhibition sowie dessen Auswirkungen sind bislang unbekannt und ihre Untersuchung steht in diesem Projekt im Mittelpunkt. Geplante Untersuchungen:
1.Untersuchung der purinergen Signaltransduktion mittels Echtzeit-Calciummessung an vitalen, kultivierten und primär isolierten Alveolarepithelzellen
2. Gezielte Mutagenese und Transfektion von verschiedenen P2Y2-Rezeptorkonstrukten
3. Verfolgung der zellulären P2Y2-Rezeptortranslokalisation mittels Laser-Spinning-Mikroskopie
4. Untersuchung der P2Y2-Phosphorylierung (Proteinanalyse)
5. Identifikation der für die P2Y2-Inhibition verantwortlichen bakteriellen Virulenzfaktoren sowie Entwicklung einer transgenen Maus mit S. pneumoniae-„resistentem“ P2Y2 (geplant).