Die DNA Immunisierung mittels "Gene-gun" ist eine außerordentlich effiziente und schonende Methode zur Herstellung von Antikörpern gegen funktionell interessante Zellmembranproteine (Koch-Nolte et al., 1999 a,b). Die dabei erzeugten Antikörper erkennen - anders als die meisten gegen synthetische Peptide generierten Antikörper - das nativ gefaltete Protein. Damit sind diese Antikörper insbesondere für funktionelle Untersuchungen, für die Immunpräzipitation und Affinitätsreinigung des Antigens, sowie für den in situ Nachweis des Antigens mittels Immunfluoreszenz, FACS oder Immunhistologie geeignet. Lediglich für Western-Blot Analysen sind gegen synthetische Peptide generierte Antikörper meist besser geeignet.

Wir haben zeigen können, dass über die DNA-Immunisierungstechnik auch Antikörper gegen intrazelluläre Proteine induziert werden können, wenn es gelingt, die entsprechenden Proteine in toto oder als Subdomäne auf der Zelloberfläche zu exprimieren. In mehreren Fällen ist es uns gelungen, monoklonale Antikörper aus DNA-immunisierten Ratten herzustellen.
Dies Projekt ist besonders aktuell, weil zunehmend interessante Gene über in silico Recherchen der Genomdatenbanken sowie über die DNA-Array Technologie identifiziert werden und für die nähere Charakterisierung dieser Gene Antikörper benötigt werden, welche die von den Kandidatengenen kodierte Proteine erkennen. Ziele des Projekts sind die Optimierung und Standardisierung der DNA-Immunisierung und die Anwendung dieser vielversprechenden Technik für die Herstellung neuer experimenteller und diagnostischer Werkzeuge gegen funktionell interessante Proteine.

Literaturauswahl (weitere Veröffentlichungen siehe unter Publikationen):
Seman M, Adriouch S, Scheuplein F, Krebs C, Freese D, Glowacki G, Deterre P, Haag F, Koch-Nolte F.
"NAD-induced T cell death: ADP-ribosylation of cell surface proteins by ART2 activates the cytolytic P2X7 purinoceptor."
Immunity. 2003 Oct;19(4):571-82.

F. Koch-Nolte, F. Haag, F. Iglauer & J. Dimigen:
"DNA immunization - an interesting option for raising antibodies against molecularily characterized proteins" in:
Versuchstierkunde: Mittler zwischen Forschung und Tierschutz
Zentrale Universitätsdruckerei, Berlin: 71-87 (1999a)

F. Koch-Nolte, T. Duffy, M. Nissen, S. Kahl, N. Killeen, V. Ablumatis, F. Haag & E.H. Leiter:
"A new monoclonal antibody detects a developmentally-regulated ecto-ADP-ribosyltransferase on T cells: subset distribution, inbred strain variation, and modulation upon T cell activation"
J. Immunol. 163: 6014-6022 (1999b)